用吖啶酯直接标记抗体，与待测标本中相应的抗原发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H202）和NaOH使成碱性环境，吖啶酯即可在不需要催化剂的情况下分解、发光。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。
直接化学发光速度快、试剂稳定性好。

碱性磷酸酶(ALP)和1，2-二氧环己烷构成的发光体系是目前最重要、最灵敏的化学发光体系，其中最具代表性的是ALP-AMPPD发光体系。该反应体系以碱性磷酸酶标记抗体，在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，这时加入AMPPD发光剂，碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。