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阿卡索生物应用系列——链霉亲和素磁珠
阿卡索生物供应高性能链霉亲和素磁珠,具备超顺磁性,粒径均一,形貌规整。产品规格及实例请见文末。
链霉亲和素Streptavidin,也叫链霉抗生物素蛋白,是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质,属于四聚体蛋白,分子量多为65kDa。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸构成中,甘氨酸和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基。
链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素,因此,一个链霉亲和素分子可以结合4个生物素分子,二者亲和常数(K)为1015mol/L。在蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在N端10~12和C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
1mg链霉亲和素的最高活性可达18U。链霉亲和素-生物素相互作用的超高结合亲和力适用于广泛的应用。相关实例包括核酸的直接/间接捕获、分离和下游处理,DNA/RNA 结合蛋白、蛋白/多肽纯化,蛋白互作研究,免疫沉淀,免疫检测,噬菌体展示,生物淘选,药物筛选和细胞分离等。
亲和素(Avidin,AV)主要来源于鸡蛋清。AV与SA在空间结构和生物素的亲和力方面具有高度的相似性。与AV不同的是,链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH 6.0)的蛋白质,并且不带任何糖基。Avidin的pI=10~10.5,在中性pH条件下呈碱性。由于SA和AV相比在中性条件下不带电荷,因此SA的非特异性结合比AV低很多。相应的,检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用SA替代AV。
AV与SA的相同点
1. 生物素结合能力:AV:13~15U,SA:14~18U
2. 活性中心依赖于色氨酸-懒氨酸:亲和素在氨基酸序列的70-70和110-111两个位点有色氨酸-懒氨酸,链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和120-121两个位点含有色氨酸-懒氨酸。
AV与SA的不同点
1. 分子量:AV=68KDa,SA=65KDa
2. 等电点:AV=10.5,SA=6.0,AV带正电较多,非特异性结合较强
3. 位阻效应:SA的生物素结合位点较AV深,位阻效应较强,长臂生物素更适合
4. 生物素的结合:AV随机结合,SA协同结合
5. 氨基酸序列:AV含二硫键和10%糖;SA含甘氨酸丙氨酸较多,无糖和二硫键
生物素(Biotin)分子量小,对蛋白质的功能干扰低,可广泛应用于各种标记(如核酸,蛋白,基因,纳米材料,分离填料等)。链霉亲和素SA及其衍生物与生物素具有极高的亲和力和非凡的特异性,这使得链霉亲和素SA磁珠在生物医药领域内应用非常广泛。
SA-Biotin复合物可以耐受变性剂(如盐酸胍),去垢剂(如SDS),蛋白水解酶,极端温度(4~90°C)和pH环境(2~8)。SA-Biotin系统在基础和临床影像学、蛋白质纯化、抗原抗体和酶等蛋白材料固定,免疫检测,临床诊断试剂,组织免疫化学,靶向药物投放等领域得到广泛应用和尝试。
<链霉亲和素实验流程示意图>
苏州阿卡索生物科技的链霉亲和素磁珠(Streptavidin磁珠,SA磁珠),由超顺磁性纳米粒和高品质的链霉亲和素共价偶联而成,能够快速、高效、灵敏、特异性地与生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等分子结合。
主要指标:
产品系列 | 链霉亲和素SA磁珠 |
平均粒径 | 300nm,1μm,2.8μm |
分散性 | 单分散 |
表面电位 |
约-20~30mV |
表面基团含量 | 80~90μg/mg |
偶联量 |
≥20μg/mg lgG ≥10pmol 双链DNA ≥2000pmol 自有生物素 |
产品包装 | 0.2mL,1mL,5mL,10mL |
浓度 | 10mg/mL |
结合载量高:每毫升磁珠悬浮液含10mg磁珠,每毫克磁珠可以结合超过20μg IgG,或2000pmol自有生物素,可高效进行免疫沉淀等实验。
低非特异性:可特异性地结合生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等分子。具备低非特异性吸附的特点,产物纯度高,有效提高实验效率。
标记速度快:具备多种粒径规格。其中,300nm和1μm粒径的磁珠比表面积大,磁含量高,有效缩短SA与生物素的结合时间,提高实验效率,并可避免配体分子失活。
使用难度低:保存于保护性缓冲液中,磁性分离,无需离心。在不同的使用场景下(如常规少量样本检测或自动化高通量筛选等)有较高的一致性,有效降低实验难度。
更多产品信息及详情请访问:
阿卡索生物官网:www.akso-biotech.com
联系销售人员:18668015075,鲍先生